动物包虫抗体ELISA检测试剂盒使用说明书

     更新时间:2019-06-19       浏览量:
【产品名称】
通用名称:动物包虫抗体ELISA检测试剂盒
英文名称:Hydatid( Hyd) Antibody Test Kit for Livestock
【用途】本试剂盒采用夹心ELISA方法定性检测动物血清或血浆中的特异性包虫抗体,可作为包虫病辅助检测。
规格】96T/盒,192T/盒。
【储藏与有效期】2~8℃保存,有效期12个月。
【试剂盒组成】
名称 数量 名称 数量
抗原包被板 96T/192T 终止液 15mL
酶标结合物 12mL/22mL 阳性对照 1mL
洗涤液10× 100mL 阴性对照 1mL
底物液 15mL 封板膜 3片/6片
显色液 15mL 说明书 1份
样品稀释液 25mL    
 
【溶液配制】洗涤液(1×PBST):将本试剂盒配备的洗涤液10×用无离子水或超纯水作1:10稀释后即为工作浓度的洗涤液。
【实验准备】所有试剂使用前恢复至室温(25℃左右),以免温度过低影响抗原抗体反应。
【样品要求】
1. 本试剂仅适用于检测牛、羊等血清或血浆。
2. 为取得最佳实验效果,避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品;
3. 短期(3天内)将进行检测的血清样品可存放于 2~8℃;如需长期保存,应置于-20℃
以下,避免反复冻融。
【操作步骤】
1.加样品稀释液:每孔加样品稀释液50 μL。
2.加样反应:样品孔,每孔仅加入50μL待检样品;阴性对照2孔,每孔仅加入50μL阴性对照品;阳性对照2孔,每孔仅加入50μL阳性对照品。盖好封板膜,37℃避光反应 30分钟。
3.洗板:甩去孔内液体,每孔注满工作浓度洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟;最后一次甩净,拍干。
4.加酶反应:每孔加酶标结合物100μL,盖好封板膜,37℃避光反应 30 分钟。甩去孔内液体,如上洗板,拍干。
5.显色反应:按所需用量,临用前取等体积底物液和显色液充分混匀,每孔加100 μL,盖好封板膜,37℃避光反应10分钟。
6.终止反应:加终止液50μL,用酶标仪于450nm波长(630nm作为参比波长)读取OD值。
【结果判定】
1. Cut-off值(COV)=阴性对照平均OD值×2.1 (阴性对照孔OD 值<0.1 时,按0.1 计)。
2. 有效性判定:
阴性对照孔OD值≤0.15(若大于0.15则实验无效);
阳性对照孔OD值≥0.30(若小于0.30则实验无效)。
判定标准
样品OD值≥COV,判为包虫抗体阳性;
样品OD值<COV,判为包虫抗体阴性。
【检验方法的局限性】本试剂盒仅供筛查,不作为确诊依据。
【注意事项】
1. 所有试剂使用前恢复至室温(25℃左右),以免温度过低影响抗原抗体反应。
2. 加试剂前应将试剂轻摇、混匀。。
3. 包被板反应时严禁堆叠放置,应该平铺且板间有空隙,不要离温箱壁太近。
4. 实验所用移液器及设备应定期校准。
5. 孵育时必须用封板膜密封板孔,封板膜不可以重复使用。
6. 底物液和终止液对皮肤有刺激性,请带手套注意个人防护。 
【技术支持】 王金良                                   电话:0543-3403060
仅供兽医诊断使用



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编辑:熊方方




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