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【产品名称】
通用名称：犬细粒棘球绦虫抗原ELISA检测试剂盒
英文名称：Hydatid（ Hyd） coproantigens Test Kit for Canine.
【用途】 本试剂盒采用夹心ELISA方法定性检测犬粪细粒棘球绦虫抗原。
【规格】 96T/盒，192T/盒
【储藏与有效期】 2～8℃保存，有效期12个月。
【试剂盒组成】

名称	数量	名称	数量
抗原包被板	96T/192T	终止液	15mL
酶标结合物	12mL/ 22mL	阳性对照	0.8mL
洗涤液10×	100 mL	阴性对照	0.8mL
底物液	15mL	封板膜	3片/6片
显色液	15mL	说明书	1份
样品稀释液2X	100mL

 
【溶液配制】
1.洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将洗涤液 10×按 1:10 稀释，充分混匀即为工作浓度洗涤液。
2.样品稀释液配制：用蒸馏水或去离子水将样品稀释液 2×按1:1 稀释（如取100mL 浓缩样品稀释液加 100mL 蒸馏水或去离子水），充分混匀即为工作浓度样品稀释液。
【实验准备】所有试剂使用前恢复至室温(25℃左右)，以免温度过低影响抗原抗体反应。
【样品要求】
1. 本试剂适用于检测犬粪样品；
2. 应采集新鲜的犬粪样品进行测试。若不能及时检测，应将粪样低温冻存，防止腐败或反复冻融。如犬粪难以溶解，应适当捣碎处理。
【操作步骤】
1.样品处理：犬粪样品需要预先低温（ -70℃以下） 冷冻 7 天以上，以灭活虫卵。称取 1克犬粪,加入1mL样品稀释液，充分搅拌混匀，静置10分钟，再3000rpm离心10分钟，取上清液待检。
2.加样反应：样品孔，每孔仅加入100μL待检样品；阴性对照2孔，每孔仅加入100μL阴性对照品；阳性对照 2 孔，每孔仅加入 100μL 阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。
3.洗板：甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗板6 次，每次均需静置1分钟；最后一次甩净，拍干。
4.加酶反应：每孔加酶结合物100μL，盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。
5.显色反应：按所需用量，临用前取等体积底物液和显色液充分混匀后每孔加100μL，盖好封板膜，37℃避光反应10分钟。
6.终止反应：加终止液50μL，用酶标仪于450nm波长（630nm作为参比波长）读取OD值。
【结果判定】
1. Cut-off 值（COV）=阴性对照平均OD值×2.1（阴性对照孔OD 值＜0.15 时按0.15计）。
2. 有效性判定：
阴性对照孔 OD 值≤0.30（ 若大于 0.30 则实验无效）；
阳性对照孔 OD 值≥0.50（ 若小于 0.50 则实验无效）。
【判定标准】
样品 OD 值≥COV， 判为犬细粒棘球绦虫抗原阳性；
样品 OD 值＜COV， 判为犬细粒棘球绦虫抗原阴性。
【检验方法的局限性】本试剂盒仅供筛查，不作为确诊依据。
【注意事项】
1. 所有试剂使用前恢复至室温(25℃左右)，以免温度过低影响抗原抗体反应。
2. 实验前应用温度计检查温箱温度，温度过高或过低影响OD值高低。
3. 包被板反应时严禁堆叠放置，应该平铺且板间有空隙，不要离温箱壁太近。
4. 实验所用移液器及设备应定期校准。
5. 底物液和终止液对皮肤有刺激性，请带手套注意个人防护。 
【技术支持】 王金良                                   电话：0543-3403060