口蹄疫病毒非结构蛋白(3ABC)抗体检测试剂盒使用说明书

     更新时间:2019-06-14       浏览量:
【产品名称】
通用名称:口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒
【用途】本试剂盒是利用口蹄疫病毒重组3ABC非结构蛋白包被ELISA板,并由该蛋白特异的单抗作为竞争抗体建立的竞争ELISA方法。
规格】 2块96孔ELISA板。
【储藏与有效期】 2~8℃保存,有效期12个月。
【试剂盒组成】
名称 数量 名称 数量
3ABC蛋白包被ELISA板 2块(96孔) 终止液 12mL
底物液 12mL 阳性对照 0.5mL
20X洗涤液 25mL 阴性对照 0.5mL
酶标结合物 12mL 封板膜 2片
样品稀释液 15mL 说明书 1份
【溶液配制】 20X洗涤液(20×PBST):将本试剂盒配备的洗涤液20×用无离子水或超纯水作1:20稀释后即为工作浓度的洗涤液。
【实验准备】所有试剂使用前恢复至室温(25℃左右),以免温度过低影响抗原抗体反应。
【操作步骤】
  1. 加样品   阴性对照(A1B1)、阳性对照(C1D1)对照均作2孔平行,直接在相应孔内加入50ul对照血清。被检样品作1:5稀释,预先在被检样品孔内加入30ul稀释液,再加入20ul被检血清,最后在所有孔内均加入50ul的酶标结合物。反应体系即100ul/孔,混匀,37℃孵育30分钟。
  2. 加底物液   用1倍PBST洗涤液洗板3遍,最后一次拍干,加入TMB底物液,50ul/孔,37℃孵育15分钟,加入终止液50ul/孔,终止反应。
  3. 酶标仪450nm波长读数。
【结果判定】
1.试验成立判定
    两孔阴性对照OD450nm值至少一孔OD值大于0.5;两孔阳性对照至少一孔的P/N比值小于0.5。
2.S/N比值法判定结果
即S/N=样品OD值/阴性对照OD值。
S/N≤0.5判为口蹄疫病毒非结构蛋白抗体阳性;S/N>0.5判为口蹄疫病毒非结构蛋白抗体阴性。
【注意事项】
1. 所有试剂使用前恢复至室温(25℃左右),以免温度过低影响抗原抗体反应。
2. 实验前应用温度计检查温箱温度,温度过高或过低影响OD值高低。
3. 包被板反应时严禁堆叠放置,应该平铺且板间有空隙,不要离温箱壁太近。
4. 实验所用移液器及设备应定期校准。
5. 采集的样品要新鲜,并且最好不要溶血。血清标本在2~8℃放置不要超过2天,室温不超过8小时,如需长时间放置应储存于-20℃。
【技术支持】 王金良                          电话:0543-3403060
仅供兽医诊断使用



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编辑:熊方方




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